返回首頁 在線留言 聯系我們
首頁 > 技術支持 > 分子篩層析蛋白純化系統的一般原則

技術支持

分子篩層析蛋白純化系統的一般原則
發布時間:2016-08-28   點擊次數:1314次
分子篩層析蛋白純化系統要利用不同蛋白間內在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染,而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。
 
分子篩層析蛋白純化系統大致分為粗分離階段和精細純化階段二個階段。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細胞成分如DNA、RNA等分開,由于此時樣本體積大、成分雜,要求所用的樹脂高容量、高流速,顆粒大、粒徑分布寬.并可以迅速將蛋白與污染物分開,防止目的蛋白被降解。精細純化階段則需要更高的分辨率,此階段是要把目的蛋白與那些大小及理化性質接近的蛋白區分開來,要用更小的樹脂顆粒以提高分辨純化的*步,它可以初步粗提蛋白質,去除非蛋白成分。
蛋白質在硫酸銨沉淀中較穩定,可以短期在這種狀態下保存中間產物,當前蛋白質純化多采用這種辦法進行粗分離翻。在規?;a上硫酸銨沉淀方法仍存在一些問題,硫酸銨對不銹鋼器具的腐蝕性很強。其他的鹽如硫酸鈉不存在這種問題,但其純化效果不如硫酸銨。除了鹽析外蛋白還可以用多聚物如PEG和防凍劑沉淀出來,PEG是一種惰性物質,同硫酸銨一樣對蛋白有穩定效果,在緩慢攪拌下逐漸提高冷的蛋白溶液中的PEG濃度,蛋白沉淀可通過離心或過濾獲得,蛋白可在這種狀態下長期保存而不損壞。蛋白沉淀對蛋白純化來說并不是多么好的方法,因為它只能達到幾倍的純化效果,而在達到目的前需要上千倍的純化。其好處是可以把蛋白從混雜有蛋白酶和其他有害雜質的培養基及細胞裂解物中解脫出來。

分享到:

返回列表 | 返回頂部
網站首頁 公司簡介 產品中心 應用案例 技術支持 企業動態 聯系我們
上海金達生化儀器有限公司(www.gevezealemi.com)主營產品導航:離子交換蛋白純化系統,分子篩層析蛋白純化系統,金屬螯合蛋白純化系統,DEAE蛋白純化系統
版權所有 總訪問量:151013
電話:021-64502702 傳真:021-64502103 地址:上海市劍川路2號右側二樓
GoogleSitemap 技術支持:中國化工儀器網 管理登陸 ICP備案號:
聯系人: 王招娣
電話:
021-64502702
手機:
021-64502702
點擊這里給我發消息
 
jk自慰到不停喷水_欧美日韩精品久久久久_亚洲国产美国国产综合一区二区_国产成人一区二区三区_被医生按摩玩到高潮视频