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凝膠層析蛋白純化系統常用破碎組織細胞的方法
發布時間:2018-01-28   點擊次數:1158次
凝膠層析蛋白純化系統從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。
凝膠層析蛋白純化系統的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。
一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個物相中,如鹽析,有機溶劑提取,層析和結晶等;
二是將混合物置于單一物相中,通過物理力場的作用使各組分分配于來同區域而達到分離目的,如電泳,超速離心,超濾等。
 
凝膠層析蛋白純化系統常用的破碎組織細胞的方法有:
1.機械破碎法
這種方法是利用機械力的剪切作用,使細胞破碎。常用設備有,高速組織搗碎機、勻漿器、研缽等。
2.滲透破碎法
這種方法是在低滲條件使細胞溶脹而破碎。
3.反復凍融法
生物組織經凍結后,細胞內液結冰膨脹而使細胞脹破。這種方法簡單方便,但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜采用此法。
4.超聲波法
使用超聲波震蕩器使細胞膜上所受張力不均而使細胞破碎。
5.酶法
如用溶菌酶破壞微生物細胞等。

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