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根據分子篩層析蛋白純化系統帶電性質進行分離
發布時間:2019-10-29   點擊次數:883次
分子篩層析蛋白純化系統一般是通過生化方法吧蛋白提取出來,蛋白質帶有電荷么,是將混合樣品中的蛋白質,其原理是向基于蛋白質PI不同用等電聚焦,電泳時的正極與負極都會發生電解反應,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。是根據蛋白質的電荷不同即酸堿性質不同分離蛋白質混合物的方法。
 
分子篩層析蛋白純化系統小分子量的化合物進入凝膠孔中,滯留時間長;大分子量的化合物不能進入空中,會更早的被洗脫下來。分子篩色譜的優勢在于能夠處理至少1nmol的目的蛋白,并得到很好的分離效果,分離時間也很短,一般在3個小時以內,同時獲得的層析分離峰也更小。
 
根據分子篩層析蛋白純化系統帶電性質進行分離
蛋白質在不同pH環境中帶電性質和電荷數量不同,可將其分開。
1、電泳法
  各種蛋白質在同一pH條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成一個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶一定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用于分析和制備各種蛋白質。
 
2、離子交換層析法
  離子交換劑有陽離子交換劑和陰離子交換劑,當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨后用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來。

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