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離子交換蛋白純化系統纖維素的預處理
發布時間:2015-09-06   點擊次數:1561次
離子交換蛋白純化系統纖維素的預處理:
  (1)稱取5gDE-32,撒在盛有75ml 0.5mol/L HCl的燒杯中,室溫放置30min,不時輕輕攪拌。
  (2)將糊狀物移入3號砂芯漏斗中,用蒸餾水淋洗。如此重復,每加一次去離子水,浸泡一段時間,再進行抽濾,至洗滌液pH等于4即可(pH試紙試)。
  (3)將糊狀物移入燒杯中,加入75ml 0.5mol/L NaOH,放置30min,不時輕輕攪拌,棄去上清液,依同法用0.5mol/L NaOH再處理一次。
  (4)將交換劑移入3號砂芯漏斗中,反復用去離子水淋洗,直至洗滌液pH為8.0(可用pH試紙測試)。
  (5)將DEAE-纖維素浸泡在150ml去離子水中.用0.5mol/L 鹽酸把pH調至7.6,滴定可在pH計上進行,須使懸液zui終pH在10min內無變化,然后抽濾。
  (6)將上述濾塊置于100毫升量筒中,加入75ml緩沖液I,慢慢攪混之后,靜置20min,用傾斜法除去上清液中細微粒子,如此重復若干次,zui后上清液pH與緩沖液I幾乎一致。

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