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疏水性層析蛋白純化系統的分離原理及要遵循的基本原則
發布時間:2020-12-23   點擊次數:885次
   疏水性層析蛋白純化系統可以快速檢測、分離、純化多種生物樣品,能夠有效的針對各種樣品:植物、動物、人類生物體,純化、分離特異性生物小分子。適合實驗室摸索等小規模生產。
 
  疏水性層析蛋白純化系統的分離原理:
  凝膠過濾-----依賴于分子的大小和形狀
 
  吸附層析-----依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵數量和質量
 
  分配層析-----依賴于被分離化合物在流動相(溶劑)和固定相(凝膠)之間的分配,這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的。
 
  疏水性層析蛋白純化系統遵循的基本原則:
  1.待純化無料樣品的來源,目的蛋白的理化性質要充分了解熟悉(基本包括分子量、PI、主要雜蛋白來源等);
 
  2.純化工藝設計時要明確純化所要達到的期望目標目標;
 
  3.依據所要達到的期望目標,對純度,回收率,活性、實驗成本等因素合理取舍,設計科學合理的純化工藝;
 
  4.熟悉蛋白純化過程的各種常用添加劑的性能和作用,合理的添加使用,可以是純化工藝事半功倍。
 
  應用注意事項:
  不同配基及配基濃度介質疏水作用力不同。
 
  不同蛋白疏水層析時,或者使用不同疏水層析介質純化,緩沖液中鹽濃度不一樣。
 
  溫度和pH對蛋白疏水性影響較大,疏水層析過程中pH和溫度要恒定。

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