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疏水性層析蛋白純化系統操作規程
發布時間:2015-11-12   點擊次數:1870次
1、使用前,根據自己所要分離蛋白的性質確定所需的分離柱及緩沖液,打開計算機及儀器,但不要急于打開軟件,等計算機與儀器連接再打開軟件,此過程大約需要3-5分鐘。
2、將純水先抽濾脫氣(使用≤0.45μm的濾膜),然后選擇流路連到機器上,先洗泵,然后給機器一個流速和壓力。選擇的zui高壓力須小于柱子所能承受的壓力極限。
3、將柱子連接到儀器上,接柱子時,須等進液管中的液體出來,將柱子的一頭與進液管通過接頭連接,先不要擰的太緊,等液體從柱子的另一頭流出,再用接頭將其與出液管相連擰緊,再將進液管端擰緊,這樣防止柱子中進入氣泡,影響分離效果。
4、柱子接上后,換上配好的緩沖液(須抽濾脫氣)用緩沖液平衡至儀器的各條基線都平后,再上樣。
5、上樣時,必須通過濾膜過濾(0.22μm),具體上樣體積視樣品濃度而定,采用不同的上樣環上樣。
6、儀器使用完畢,切記要用純水清洗泵和柱子,洗柱直至各條基線都平為止,防止鹽和粒子結晶于泵和柱子使機器報廢。若長期不用,再用20%的乙醇清洗系統和柱子,防止泵和柱子生長微生物(這一步非常重要)。
7、儀器的PH計每隔一段時間(一個月)須校準一次。紫外流動池也需定期清洗(三個月)。

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