疏水性層析蛋白純化系統操作規程

1、使用前，根據自己所要分離蛋白的性質確定所需的分離柱及緩沖液，打開計算機及儀器，但不要急于打開軟件，等計算機與儀器連接再打開軟件，此過程大約需要3-5分鐘。

2、將純水先抽濾脫氣（使用≤0.45μm的濾膜），然后選擇流路連到機器上，先洗泵，然后給機器一個流速和壓力。選擇的zui高壓力須小于柱子所能承受的壓力極限。

3、將柱子連接到儀器上，接柱子時，須等進液管中的液體出來，將柱子的一頭與進液管通過接頭連接，先不要擰的太緊，等液體從柱子的另一頭流出，再用接頭將其與出液管相連擰緊，再將進液管端擰緊，這樣防止柱子中進入氣泡，影響分離效果。

4、柱子接上后，換上配好的緩沖液（須抽濾脫氣）用緩沖液平衡至儀器的各條基線都平后，再上樣。

5、上樣時，必須通過濾膜過濾（0.22μm），具體上樣體積視樣品濃度而定，采用不同的上樣環上樣。

6、儀器使用完畢，切記要用純水清洗泵和柱子，洗柱直至各條基線都平為止，防止鹽和粒子結晶于泵和柱子使機器報廢。若長期不用，再用20%的乙醇清洗系統和柱子,防止泵和柱子生長微生物（這一步非常重要）。

7、儀器的PH計每隔一段時間（一個月）須校準一次。紫外流動池也需定期清洗（三個月）。