返回首頁 在線留言 聯系我們
首頁 > 企業動態 > 離子交換蛋白純化系統的基本操作

企業動態

離子交換蛋白純化系統的基本操作
發布時間:2016-08-21   點擊次數:1001次
離子交換蛋白純化系統為蛋白等生物樣品的純化制備而專門設計,高性能輸液泵不僅耐受高壓,而且在低溫低壓下具有良好的穩定性,為低壓色譜柱提供安全保證;采用DAD檢測器,可方便實時監測分離組分的純度。另外,SCG配備酸度/電導檢測器可即時監測分離時的梯度環境。
 
離子交換蛋白純化系統的基本操作  
1、DEAE-纖維素的預處理:  
稱取2gDE-52,置于砂芯漏斗中,先在20mL0.5mol/LNaOH中浸泡30min,然后用蒸餾水淋洗至pH=8.0,再用20mL0.5mol/LHCl浸泡30min,然后用蒸餾水淋洗至pH=4.0。zui后用20mL0.5mol/LNaOH浸泡30min后蒸餾水洗至pH=8.0。用洗脫液A浸泡已處理好的DEAE—纖維素,并更換1~2次。
2、裝柱取1.5ⅹ20cm層析柱一根,如圖1裝柱。裝入約10mL洗脫液A,打開下活塞讓緩沖液慢慢滴出,同時,將懸浮于適量洗脫液A中的DEAE—纖維素一邊攪動一邊倒入層析柱中,讓其自然沉降到全部加入為止。用洗脫液A以1.0ml/min的流速平衡柱子,直到流出液pH與起始緩沖液的完全相同為止。
注:裝柱時交換劑一次倒入,若分次倒入時,則須在再次添加之前將界面處的交換劑攪起,以保證柱床不分節。柱面要平整,柱中無氣泡。
3、上樣
上述平衡過程完畢后,待液面離纖維素沉降面約1cm后,關閉活塞。用滴管將樣品沿管壁小心加入,待全部樣品進入柱后,在柱床面上加一層洗脫液A。上樣量占柱體積的2.5%左右。
4、洗脫
連接洗脫瓶,打開柱下口開始洗脫。先用洗脫液A洗脫1個柱體積(收集在一個試管中),流速約0.5ml/min;然后用洗脫液B中5個梯度分別洗脫一個柱體積,分別收集,流速約0.5ml/min。
5、鑒定收集各個洗脫組分,紫外吸收法測定每個組分的蛋白含量。

分享到:

返回列表 | 返回頂部
網站首頁 公司簡介 產品中心 應用案例 技術支持 企業動態 聯系我們
上海金達生化儀器有限公司(www.gevezealemi.com)主營產品導航:離子交換蛋白純化系統,分子篩層析蛋白純化系統,金屬螯合蛋白純化系統,DEAE蛋白純化系統
版權所有 總訪問量:150943
電話:021-64502702 傳真:021-64502103 地址:上海市劍川路2號右側二樓
GoogleSitemap 技術支持:中國化工儀器網 管理登陸 ICP備案號:
聯系人: 王招娣
電話:
021-64502702
手機:
021-64502702
點擊這里給我發消息
 
jk自慰到不停喷水_欧美日韩精品久久久久_亚洲国产美国国产综合一区二区_国产成人一区二区三区_被医生按摩玩到高潮视频